分光光度計是一種實驗室儀器,用于測量特定波長的光的電磁能。每種化合物都具有吸收、反射和透射電磁波譜波長的光的能力。當光透過它們時,一小部分光被吸收。分光光度計有助于樣品的定性和定量分析。隨著物質濃度的增加,光吸收增加,透光率降低。
該儀器可用于化學、生物化學(用于酶催化反應)、物理學、生物學和臨床研究(檢查血液學或組織)。對于科學家來說,在沒有任何表面接觸的情況下檢查各種樣品非常有用,因為樣品被封裝在一個稱為比色皿的小管中,或者在光電管的情況下,估計會立即在樣品容器中進行,而無需轉移它。
用于樣品的定性分析
用于生物化學的定量分析,例如確定未知給定樣品的濃度
用于酶測定
確定特定樣品的分子量,例如苦味酸胺、酮化合物、醛和糖
用于鑒別雜質
檢測供應樣品的濃度
闡明有機化合物的結構
確定蛋白質的特性
確定水體中溶解氧的量
分析醫院的呼吸氣體
用于檢測功能組
確定特定化合物的分子量
用于確定化合物的類別
用于Bial的戊糖濃度測試
估計溶解的有機碳濃度
用于衡量芳香度的特定紫外吸光度
分光光度計設備有助于測量作為波長函數的光強度。它的工作原理是將光束衍射成不同波長的光譜,然后在電荷耦合裝置的幫助下檢測強度,并將結果以圖形的形式顯示在檢測器上,然后顯示在顯示裝置上。
在分光光度計中,光束通過使用將入射光束衍射成不同波長的棱鏡進行分離。該設備可以輕松測量化合物的吸收光譜,即溶液對每個波長的光的吸收。
分光光度計是基于濁度測定的原理。濁度或光密度是懸浮液的混濁度。懸浮液越混濁,透過它的光就越少。換句話說,吸收和散射的光量與光路中細胞的質量成正比。隨著細菌在肉湯中生長,清湯變得渾濁。由于濁度隨著細胞數量的增加而增加,因此該指標用作肉湯中細菌密度的指標。濁度也可用于標準化具有臨床意義的細菌培養物的種群密度。
分光光度計包含以下組件;
光源:光源需要在分光光度計內產生光。該材料用于光源;它應該通過高壓放電(或)通過電加熱被激發到高能狀態,以作為優良的輻射能源。
準直器(透鏡):該透鏡將光從光源指向單色器或棱鏡。
單色儀(棱鏡或光柵):它用于將多色輻射分離成分量波長(或)波長帶。單色儀將多色輻射確定為其各個波長,并將這些波長隔離為非常窄的波段。
波長選擇器(狹縫):它從分離的波長中選擇特定波長的光,并將其通過比色皿。
運輸容器(比色皿):比色皿用于盛放待研究的樣品。它由石英制成。
光敏探測器和相關的讀出系統:大多數探測器依賴于光電效應。然后,電流與光強度成正比,因此是光強度的量度。輻射探測器有助于產生與發射器光等效的電子信號。這些信號需要轉換成易于解釋的形式。這是通過使用放大器、電流表、電位計和電位記錄儀來實現的。
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